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细胞凋亡检测方法及产品(一)

细胞凋亡是细胞的一种基本生物学现象,在多细胞生物去除不需要的或异常的细胞中起着必要的作用。它在生物体的进化、内环境的稳定以及多个系统的发育中起着重要的作用。细胞凋亡不仅是一种特殊的细胞死亡类型,而且具有重要的生物学意义及复杂的分子生物学机制。凋亡是多基因严格控制的过程。

 

根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。目前检测细胞凋亡的方法有许多种,以下是几种常用的方法:

 

1)磷脂酰丝氨酸外翻分析(Annexin V /PI法)

磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine, PS)正常位于细胞膜的内侧,但在细胞凋亡的早期,PS 可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。Annexin-V 是一种分子量为 35~36KD Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与PS 高亲和力特异性结合。将 Annexin-V进行荧光素(FITCPE)或 biotin 标记,以标记了的 Annexin-V 作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。


碘化丙啶(propidine iodide, PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI 能够透过细胞膜而使细胞核红染。因此将 Annexin-V PI 匹配使用,就可以将凋亡早晚期的细胞以及死细胞区分开来。

产品名称

规格

产品编号

品牌

Annexin -FITC/PI Kit  / 凋亡检测试剂盒

20 Tests

FXP018-020

4ABio (四正柏)

Annexin -FITC/PI Kit  / 凋亡检测试剂盒

50 Tests

FXP018-050

4ABio (四正柏)

Annexin -FITC/PI Kit  / 凋亡检测试剂盒

100 Tests

FXP018-100

4ABio (四正柏)

Annexin V-eGFP / 流式检测试剂盒

20 Tests

FXP025-020

4ABio (四正柏)

Annexin V-eGFP / 流式检测试剂盒

50 Tests

FXP025-050

4ABio (四正柏)

Annexin V-eGFP / 流式检测试剂盒

100 Tests

FXP025-100

4ABio (四正柏)

AnnexinV Alexa Fluor488/PI / 凋亡检测试剂盒

20 Tests

FXP022-020

4ABio (四正柏)

AnnexinV Alexa Fluor488/PI / 凋亡检测试剂盒

50 Tests

FXP022-050

4ABio (四正柏)

AnnexinV Alexa Fluor488/PI / 凋亡检测试剂盒

100 Tests

FXP022-100

4ABio (四正柏)

AnnexinV Alexa Fluor647/PI / 凋亡检测试剂盒

20 Tests

FXP023-020

4ABio (四正柏)

AnnexinV Alexa Fluor647/PI / 凋亡检测试剂盒

50 Tests

FXP023-050

4ABio (四正柏)

AnnexinV Alexa Fluor647/PI / 凋亡检测试剂盒

100 Tests

FXP023-100

4ABio (四正柏)

Annexin V- PE/7-AAD / 凋亡检测试剂盒

20 Tests

FXP027-020

4ABio (四正柏)

Annexin V- PE/7-AAD / 凋亡检测试剂盒

50 Tests

FXP027-050

4ABio (四正柏)

Annexin V- PE/7-AAD / 凋亡检测试剂盒

100 Tests

FXP027-100

4ABio (四正柏)

Annexin V Apoptosis Detection Set PE-Cy7

1 kit

88-8103 

eBioscience

Annexin V Apoptosis Detection Kit APC

1 kit

88-8007

eBioscience

Annexin V Apoptosis Detection Kit eFluor® 450

1 kit

88-8006

eBioscience

Annexin V Apoptosis Detection Kit FITC

1 kit

88-8005

eBioscience

Annexin V PE Apoptosis Detection Kit PE

1 kit

88-8102

eBioscience

Annexin V Apoptosis Detection Kit PerCP-eFluor® 710

1 kit

88-8008

eBioscience

APC Annexin V Apoptosis Detection Kit with 7-AAD

1 kit

640930

Biolegend

APC Annexin V Apoptosis Detection Kit with PI

1 kit

640932

Biolegend

FITC Annexin V Apoptosis Detection Kit with 7-AAD

1 kit

640922

Biolegend

FITC Annexin V Apoptosis Detection Kit with PI

1 kit

640914

Biolegend

Pacific Blue™ Annexin V Apoptosis Detection Kit with 7-AAD

1 kit

640926

Biolegend

Pacific Blue™ Annexin V Apoptosis Detection Kit with PI

1 kit

640928

Biolegend

 

 

如何选择以上试剂盒?

Annexin V FITC/PI 性价比最高,也是销量最好的凋亡试剂盒;

Annexin V Alexa Fluor488/PIAnnexin V FITC/PI在流式细胞仪上检测用相同的通道,但是Alexa Fluor488这种染料荧光强度和稳定性优于FITC,细胞分群更明显;

Annexin V-eGFPAnnexin V FITC更稳定,效期更长,可以-20保存。

Annexin V Alexa Fluor647/PI用于已转染GFP细胞的凋亡检测优势明显,而且无需调补偿,避免了人为因素的干扰。

 

2Tunel检测细胞凋亡(DNA片断原位标记法)

 

细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNAtunel是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。细胞凋亡检测其原理是荧光素标记的dUTP在末端脱氧核苷转移酶(TdT)的作用下,连接到凋亡细胞中断裂的DNA3-OH末端,利用由荧光显微镜或者流式细胞检测仪检测凋亡的发生。

产品名称

规格

产品编号

品牌

Apo-BrdU Apoptosis Detection

1 Kit

88-6671

ebioscience

Apo-Direct Apoptosis Detection

1 Kit

88-6611

ebioscience

Cell Meter™ TUNEL Apoptosis Assay Kit

1 Kit

22844

AAT

【小结】:细胞发生凋亡时,膜上的PS外露早于DNA断裂发生,因此Annexin V联合PI染色法检测早期细胞凋亡较TUNEL法更为灵敏。又Annexin V联合PI染色不需固定细胞,可避免PI染色因固定造成的细胞碎片过多及TUNEL法因固定出现的DNA片段丢失。因此,Annexin V联合PI法更加省时,结果更为可靠,是目前最为理想的检测细胞凋亡的方法。