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如何30秒完成抗体标记?

新品发布 2017-06-27 浏览:303次

英国生物偶联技术专家级公司InnovaBiosciences 为您提供一步法快速标记试剂盒!Perfect!    

 

Innova Biosciences成立于2002年,是世界领先的生物偶联技术公司。其开发的产品线包括抗体和蛋白标记试剂盒、纳米颗粒、寡核苷酸标记以及ATP酶和GTP酶活检测试剂盒等。尤其是一步法抗体标记试剂盒-Lightning-Link™系列产品极大程度的简化了抗体标记流程,是目前世界上操作最简便的抗体标记试剂盒,在全球各大科研实验室得到广泛应用。

 

 

随着蛋白组学的深入研究,多因子检测的需求日趋增加。但很多科研人员在选择多种标记的抗体时遇到困难,发现很多时候从市面上购买不到所需的标记好的商业化一抗,而不得不选择使用二抗。因此也很难避免可能发生的交叉反应、非特异性结合以及繁琐的孵育洗涤步骤。下面比较下直接法与间接法的优缺点。  

 

方法

优点

缺点

直接法

操作简单,结果可靠;

仅需使用一抗,检测快速;

无二抗的非特异性结合。

由于标记可能导致一抗的免疫反应性降低;

信号放大作用较弱。

间接法

一抗含有多个标记二抗可结合的表位,因而灵敏度升高,信号放大作用较强。

二抗可能发生非特异性结合;

孵育及洗涤步骤增多。

1.直接法与间接法的比较

 

直接检测法中,标记物通过共价键直接连接到一抗上。而对于间接检测法,标记物则是共价连接到与一抗特异性结合的二抗上。间接法检测包括两步:第一步,用未标记的一抗进行孵育,抗体与抗原结合(若存在抗原),洗去未结合的抗体(一般3~5次),第二步则是加入标记二抗孵育(通常1小时),洗涤去掉未结合的二抗,然后量化结合在一抗上的标记物。在直接法中,标记物直接与一抗共价结合,因此仅需与含有抗原的样本孵育这一步骤,而且只需一次洗涤,而间接法则需要两轮孵育与洗涤步骤。直接法简化了试验的流程,降低了试验的变异性,增加了数据的可靠性。然而一抗的共价修饰可以导致抗体亲和力的改变,这种情况的出现与标记二抗带来的非特异性结合的问题相比而言,显得无关紧要。下表列举出了直接法与间接法的主要优缺点比较。   

 

 

1. 间接法与直接法流式染色比较。CD45RC纯化抗体商业化购得,然后用Lightning-LinkTM R-PE抗体标记试剂盒按流程进行标记。图中左下方流式染色结果为所购CD45RC纯化抗体孵育细胞,然后用R-PE标记二抗孵育上机检测,图中右下方流式染色结果为用Lightning-LinkTM R-PE标记的CD45RC抗体,直接孵育细胞,上机检测。图中示意图说明:CD45RC抗原用红色显示、 CD45RC抗体用蓝色显示、二抗灰色显示。   

 

InnovaBiosciences 一步法快速标记试剂盒的特点:

特点

优势

操作简单:一步法标记
 
快速: 手上操作时间仅30

节省科研时间,无需特殊专业知识和操作技能

无需脱盐、透析等分离步骤

回收率达100%,无抗体或蛋白的损失

适用于多种下游实验

灵活性较好

冻干粉提供

环境温度运输,有效期较长

可标记ug级到g级抗体量

适用于基础科研及工业生产

近乎苛刻的质检标准

高品质,批间差小,可重复性好

可提供50种标记物

可用于WBIHCELISA、免疫荧光、流式细胞术以及荧光共振能量转移检测等

认可度高,已超300多篇SCI文献引用

可成功应用于多个研究领域

 

目前,InnovaBiosciences可以提供从紫外到远红外光谱的多种荧光标记试剂盒。

 

 

除经典的荧光标记试剂盒,其他特色产品还包括:

 

  • 酶标记试剂盒(辣根过氧化物酶/碱性磷酸酶/葡萄糖氧化酶)
  • 生物素/链亲和素标记试剂盒纳米颗粒及标记试剂盒(磁珠标记、金属铕标记、乳胶珠子标记、金纳米颗粒标记、胶体金等)FlexLISA®系列ELISA套装
  • 链亲合素结合物
  • Protein A结合物
  • 抗体纯化试剂盒
  • ATP酶及GTP酶活检测试剂盒
  • 亲和树脂等  

 

 Innovabiosciences官网https://www.innovabiosciences.com/